KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI UNTUK ANALISIS SENYAWA DIURETIK YANG DISALAHGUNAKAN SEBAGAI DOPING DALAM URIN

Saeful Amin; Amir Mursadad; Slamet Ibrahim

doi:10.5614/jskk.2016.1.2.1

Authors

Saeful Amin
Amir Mursadad
Slamet Ibrahim

DOI:

https://doi.org/10.5614/jskk.2016.1.2.1

Keywords:

Hidroklorotiazid, furosemid, urin, analisis doping

Abstract

Hidroklorotiazid, furosemid, dan spironolakton sering disalahgunakan sebagai doping dalam olahraga. Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan metode simultan penentuan hidroklorotiazid, furosemid, dan spironolakton
menggunakan teknik analisis kromatografi cair kinerja tinggi (KCKT). Analit diekstraksi dari urin dengan metode ekstraksi cair-cair lalu dianalisis secara KCKT elusi landaian. Pengembangan metode mencakup validasi metode melalui pengujian linieritas, presisi, akurasi, batas deteksi dan kuantisasi, serta ketegaran metode. Sistem KCKT untuk penentuan simultan analit menggunakan kolom C18, dengan laju alir 1 mL/menit, fase gerak asetonotrildapar fosfat pH 3, sistem elusi landaian, dan detektor 229 nm. Metodeini menunjukkan hubungan yang linier antara area under the curve(AUC) dan konsentrasi analit dengan koefisien korelasi 0,999 dengan koefisien variasi fungsi regresi 2,6%, sertabatas deteksi dan kuantisasi masing-masing sebesar 0,5 dan 1,9 ppm. Keterulangan AUC ditunjukkan dengan nilai KV 0,95%, dan keterulangan waktu retensi dengan nilai KV
0,14%. Metode ini menunjukkan perolehan kembali 98,6%. Uji ketegaran metode menunjukkan bahwa perubahan laju alir 0,1 mL/menit dan pH dapar fosfat 0,2 tidak berpengaruh secara signifikan terhadap
perolehan semua analit. Namun demikian perubahan panjang gelombang pada kisaran 2 nm berpengaruh secara signifikan terhadap perolehan kembali hidroklorotiazid dan spironolakton tetapi tidak untuk furosemid.
Berdasarkan hasil pengujian secara keseluruhan dapat disimpulkan bahwa metode simultan penentuan hidroklorotiazid, furosemid, dan spironolakton secara KCKT telah berhasil didapatkan serta mampu memenuhi kriteria validasi metode analisis.

References

Blatchford, S.L. and Krupp., 2002, Drugs and Controlled Substances, Gale Group, Inc., Farmington Hills, 147-155.

Blister, D.M., 2006, Validating Chromatographic Methods a Practical Guide, John Wiley & Sons, Inc., Hoboken, 1-55.

Burgess, C., 2000, Valid Analytical and Procedures, The Royal Society of Chemistry, Cambridge, 17-69.

Ditjen POM Depkes RI, 1995, Farmakope Indonesia, ed. 4, Depkes RI, Jakarta, 400-402, 433-434, 757-758.

Ermer, J. and Miller, J.H.M., 2005, Method Validation in Pharmaceutical Analysis, A Guide to Best Practice, Wiley-VCH Verlag GmbH & Co. KgaA, Weinheim, 21-171.

Grucza, R., 2006, History of Doping, Instritute of Sport Warsaw, Warsaw, 1-22.

Harmita, 2004, Petunjuk Pelaksanaan Validasi Metode dan Cara Perhitungannya, Majalah Ilmu Kefarmasian, 1 (3), 117-135.

Heyden, Y.V., 2006, Guidance for Robustness/Ruggedness Test in Method Validation, Laarbeeklaan, Brussel, 1-40.

http://www.ladi.or.id/, 2006, Petunjuk Pengambilan Sampel Urin, Lembaga Anti Doping Indonesia (LADI), diakses tanggal 7 Februari 2009.

http://www.wada-ama.org, 2009, The 2009 Prohibited List International Standard, The World Anti-Doping Code, diakses tanggal 25 Januari 2009.

http://www.wada-ama.org, 2009, Minimum Required Performance Limits for Detection of Prohibited Substances, diakses tanggal 25 Januari 2009.

http://www.wada-ama.org, 2009, International Standard for Laboratories, diakses tanggal 25 Januari 2009.

http://www.wada-ama.org, 2008, Guideline for Laboratory Test Report, The World AntiDoping Code, diakses tanggal 25 Januari 2009.

http://www.Geocities.com/CapeCanaveral/8775/ HPLC_guide_h,.html., Reserved Phase HPLC by Dr. Shulamit Levin, Medtechnica, diakses tanggal 7 Februari 2009.

Ibrahim, S., 2005, Berbagai Pendekatan Pengujian Kelinieran Kurva Baku pada Metode Analisis Instrumental, Acta Pharmaceutica Indonesia, 30 (1), 30-34.

Ibrahim, S., 2004, Berbagai Pendekatan pada Penaksiran Batas Deteksi dan Batas Kuantisasi Suatu Metode Analisis Instrumental, Acta Pharmaceutica Indonesia, 29 (4), 153-159.

Ibrahim, S., 2001, Penggunaan Statistika dalam Validasi Metode Analitik dan Penerapannya, Prosiding Temu Ilmiah Nasional Bidang Farmasi, vi-15.

International Conference on Harmonization, Validation of Analytical Procedures: Text and Methodology, ICH Q2(R1)/2005, 1-17.

Johnson, E. L., Stevenson, R., 1991, Dasar Kromatografi Cair, terjemahan K. Padmawinata, Penerbit ITB, Bandung, 1-250.

L1/4llmann, H., dkk., 2000, Color Atlas of Pharmacology, 2nd edition, revised and expanded, Standing, Donau worth, 158-165.

Meyer, V.R., 2004, Practical High-Performance Liquid Chromatography, Ed. ke-4, Wiley-VCH Verlag GmbH & Co. KgaA, Weinheim, 1, 15-41, 169-174.

United State Pharmacopeia Convention, 2007, The United States Pharmacopeia, 30th ed., The National Formulary, 25th rev., United States Pharmacopeia Convention Inc., Rockville, 680,

, 2288, 3213.

Zendelovska, D., Stafilov, T., 2006, Sample Preparation and RPHPLC Determination of Diuretics in Human Body Fluid, Acta Pharm., 56